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Título : Validación de la determinación de los ácidos fenólicos presente en la infusión de cascarilla de la semilla de cacao (Theobroma cacao) por el equipo de electroforesis capilar
Autor : Gavica Contreras, Wendy
Colaborador(es): Quijano Avilés María Fernanda
Tutor(es): Manzano Santana Patricia
Palabras clave : VALIDACIÓN
CASCARILLA DE LA SEMILLA DEL CACAO
ELECTROFORESIS CAPILAR
ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE
POLIFENOLES
FLAVONOIDES
Fecha de publicación : 2017
Editorial : Universidad de Guayaquil. Facultad de Ciencias Químicas
Tipo: Thesis
Resumen : La cascarilla de cacao representa una fuente de polifenoles. Sin embargo, estos compuestos activos no son aprovechados para darle valor agregado a este residuo que se genera en grandes cantidades del proceso de manufactura del cacao. Este trabajo permite desarrollar un método alternativo para la identificación de ácidos fenólicos presentes en una infusión elaborada a partir de la cascarilla de la semilla de cacao (Theobroma cacao L.), el cual fue validado para garantizar la veracidad de los resultados obtenidos. El método se desarrolló empleando el equipo de electroforesis capilar, se utilizó un capilar de sílice fundida de 50 μm de diámetro interno y 30 cm de longitud efectiva con trayectoria de luz extendida, se utilizó una solución buffer de borato de 50 mmol.L-1 (pH 10,17), y se aplicó un voltaje de + 30 kV con inyección hidrodinámica de 50 mbar durante 5 s y la detección se realizó a una longitud de onda de 210 nm. El método fue validado de acuerdo a las pautas establecidas por el Consejo Internacional de Armonización de los Requisitos Técnicos para el Registro de Productos Farmacéuticos de Uso Humano (ICH). La infusión se elaboró de acuerdo a los procedimientos descritos por el Comité Europeo del Té (ETC) y la Asociación Europea de Infusiones de Hierbas (EHIA). Además, se evaluó el contenido de polifenoles totales por el método de Folin Ciocalteu, flavonoides por el método del tricloruro de aluminio, la actividad antioxidante se determinó mediante el porcentaje de inhibición de DPPH y el potencial antioxidante de reducción de hierro (FRAP). Las infusiones fueron sometidas a un proceso de derivatización (BSTFA+TMCS, 99:1) para la identificación de compuestos mediante cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas, se manejó con columna capilar de 30 m x 0,25 mm y dimetilpolisiloxano de fenilo como fase estacionaria, la temperatura del horno de 60-275°C, con inyectores de splitless y gas helio con flujo constante. En la validación, se obtuvieron resultados satisfactorios en el rango de 10 - 80 mg.L-1 para el ácido gálico, el ácido siringico y el ácido caféico, mientras que el ácido benzoico presentó un rango satisfactorio de 6 – 48 mg.L-1 y el ácido clorogénico de 8 – 64 mg.L-1 . El método fue lineal (R2 > 0,98, prueba de falta de ajuste p > 0,05).Los parámetros de selectividad, precisión (CV < 7,81%) y la exactitud (>80%) fueron adecuados para el método con límites de detección y cuantificación de 0.04 a 0.19 mg.L-1 y 0.09 a 0.56 mg.L-1 , respectivamente. No se detectaron los ácidos fenólicos (gálico, siringico, benzoico, clorogénico y caféico) en la infusión de la cascarilla de la semilla del cacao. Sin embargo, ésta presentó un contenido de polifenoles totales de 47.65 mg EAG/g, flavonoides de 8.12 mg EQ/g, una concentración inhibitoria media del DPPH de 1126 mg.L-1 y un potencial antioxidante de 312,86 mg EAA/g. Este trabajo aporta con una nueva alternativa, que permite identificar de manera rápida y eficaz lo ácidos fenólicos que pueden estar presente en una infusión, lo cual proporciona a las industrias alimenticias dedicados a la elaboración de infusiones, que puedan introducir en las etiquetas de sus productos los parámetros como: el contenido de polifenoles, flavonoides, y ácidos fenólicos
Cocoa husks represent a source of polyphenols. However, these active compounds are not used to add value to this residue that is generated in large quantities of the cocoa manufacturing process. This work allows the development of an alternative method for the identification of phenolic acids present in an infusion made from the husk of the cocoa seed (Theobroma cacao L.), which was validated to guarantee the accuracy of the results obtained. The method was developed using the capillary electrophoresis equipment, a fused silica capillary of 50 μm internal diameter and 30 cm effective length with extended light path was used, a borate buffer solution of 50 mmol.L-1 (PH 10.17), and a voltage of + 30 kV was applied with hydrodynamic injection of 50 mbar for 5 s and detection was performed at a wavelength of 210 nm. The method was validated according to the guidelines established by the International Council for Harmonization of Technical Requirements for the Registration of Pharmaceutical Products for Human Use (ICH). The infusion was prepared according to the procedures described by the European Tea Committee (ETC) and the European Herbal Infusion Association (EHIA). In addition, the content of total polyphenols by the Folin Ciocalteu method, flavonoids was evaluated by the aluminum trichloride method, antioxidant activity was determined by percentage of DPPH inhibition and antioxidant potential iron reduction (FRAP). The infusions were subjected to a derivatization process (BSTFA + TMCS, 99: 1) for the identification of compounds by gas chromatography coupled to mass spectrometry, handled with a 30 mx 0.25 mm capillary column and phenyl dimethylpolysiloxane as Stationary phase, oven temperature of 60-275 ° C, with splitless injectors and constant flow helium gas. In the validation, satisfactory results were obtained in the range of 10 -80 mg.L-1 for gallic acid, syringic acid and caffeic acid, while benzoic acid presented a satisfactory range of 6-48 mg.L- 1 and chlorogenic acid of 8-64 mg.L-1. The method was linear (R2> 0.98, non-fit test p> 0.05). Selectivity, precision (CV <7.81%) and accuracy (> 80%) parameters were adequate for the method With limits of detection and quantification of 0.04 to 0.19 mg.L-1 and 0.09 to 0.56 mg.L-1, respectively. Phenolic acids (gallic, syringe, benzoic, chlorogenic and caffeic) were not detected in the infusion of the cocoa seed husk. However, it had a total polyphenol content of 47.65 mg EAG / g, flavonoids of 8.12 mg EQ / g, an average inhibitory concentration of DPPH of 1126 mg.L -1 and an antioxidant potential of 312.86 mg EAA / g . This work provides a new alternative, which allows to identify quickly and efficiently the phenolic acids that may be present in an infusion, which provides the food industries dedicated to making infusions, which can introduce into the labels of their products The parameters as: the content of polyphenols, flavonoids, and phenolic acids
Descripción : Pdf
URI : http://repositorio.ug.edu.ec/handle/redug/19998
Aparece en las colecciones: Tesis - Químicos Farmacéuticos

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